变温桥所含的等位基因特异引物添加个性化的人工序列，实现了不同基因型熔解温度差异的放大，因此可准确实现SNP、InDel位点的分型，精准区分纯合、杂合基因型。

体系组成

变温桥基因分型试剂内含核酸染料及反应必须的酶、dNTP、缓冲液。

需另行设计目标位点特异引物，包括两条等位基因特异引物及一条反向公用引物。两条等位基因特异引物可分别与反向共用引物组合进行PCR扩增。

反应过程

• 等位基因特异引物结合于目标位点，与反向公用引物组合，进行PCR扩增。

• PCR扩增结束后，进行升温变性、降温复性的过程，监测核酸染料所释放荧光信号的变化，计算PCR产物的熔解温度，进而确定基因型。